5L jatkuva virtaus termostaattinen ultraääni homogenisaattori Sonicator

Ultraäänihomogenisaattorin Sonicatorin käyttö Streptomycesissa

K: Mitkä ovat olosuhteet Streptomyces-ultraäänilaitteille?

A: Esikäsittely on yleensä konfiguroitu bakteerisuspension konsentraationa. Ultraäänihäiriö suoritettiin käyttämällä ultraäänisoluisen pulverisaattoria. Tähän mennessä hyväksytyt erityisedellytykset ovat seuraavat:

1. Bakteerista 24 tunnin viljelyalustaa sentrifugoitiin 5 000 r / min 5 minuutin ajan solujen keräämiseksi.

2. Pese 3 kertaa Na2HPO-NaH2PO-puskurilla, pH 7,5, ja sekoita sitten bakteerit 1: 3-suspensioon tämän puskurin kanssa. Sijoitetaan 40 ml: n suuruiseen muoviputkeen.

3. Aseta suuri muovinen koeputki jäähauteeseen ja käytä ultraäänilaitetta rikkoutumaan (teho 200 W, 1/2 "koetin, murskaus 30 s, ajoittainen 30 s).

4. Murskattu neste sentrifugoitiin nopeudella 12 000 r / min 30 minuutin ajan suurella nopeudella kerääntymään solujätteet ja supernatantti. Ultraäänihaittausmenetelmä oli periaatteessa sama kuin edellä, toisin sanoen pestyjä soluja voidaan myös esijäähdyttää fysiologinen suolaliuos tai pH 8 Tris. -HCI, pese kerran. Lisäksi ultraäänimäärä vaihtelee huomattavasti näytteen määrän ja bakteerien mukaan. Teho voi saavuttaa 400-600 w, ylittää 5s, pysähtyä 5 sekunnin ajan, jäähaude ja lisätä PMSF: ää lopullisella pitoisuudella 1 mM. Asianmukaisen ultraäänen voimakkuuden ja taajuuden määrittämiseksi on milloin tahansa tarkkailtava mikroskooppinen tutkimus sen selvittämiseksi, ovatko solut täysin rikki. Actinomyytit kuuluvat Gram-positiivisten bakteerien sukuun, jossa on suuri (G + C) mooliprosentti (mol%) prokaryoottisten systeemien filogeneettiseen puuhun. Kun tehdään E. coli-ultraääni, käytetään 400 W: n ultraäänisolusekoitinta ja super 5 -standardin 5 menetelmä on hyvä, mutta sillä ei näytä olevan vaikutusta Streptomycesiin. Se johtuu eroista soluseinän koostumuksessa, koska E. coli on Gram-negatiivinen bakteeri.

Proudct Photo